藥物(wù)研發中(zhōng)如何确定創新藥及仿制藥雜(zá)質限度

  在藥品研發中(zhōng)，如何證實藥品安全有效應該是研發人員(yuán)始終關注的問題；而藥品質量的穩定可控又(yòu)是保證其安全有效的前提與基礎。如果一(yī)個藥品的質量不能達到穩定與可控，在使用時這一(yī)藥品就不可能始終安全、有效，也就不能被批準上市。保證藥品質量穩定可控，藥品的純度是一(yī)個重點。如何确定雜(zá)質的限度是藥學研究人員(yuán)與審評人員(yuán)不能回避的關鍵問題，該限度的制訂是否科學、合理，直接關系到藥品的安全性與質量。藥品在臨床使用中(zhōng)産生(shēng)的不良反應除與該藥品本身的藥理活性有關外(wài)，也有一(yī)部分(fēn)與藥品中(zhōng)所混入的其它雜(zá)質有關。例如，通過我(wǒ)國藥學科技工(gōng)作者數十年的努力，基本上确定青黴素等抗生(shēng)素中(zhōng)的多聚物(wù)等高分(fēn)子雜(zá)質是引起過敏的主要原因。所以在研發過程中(zhōng)一(yī)定要對藥品中(zhōng)的雜(zá)質進行全面研究，并将雜(zá)質完全準确地控制在一(yī)個合理的範圍之内。
  盡管雜(zá)質限度的确定對于藥品研發非常重要，但國内藥品研發的現實情況并不令人樂觀。從近幾年的新藥申報情況分(fēn)析，在雜(zá)質的研究與限度确定方面存在着較多的問題，主要表現爲：部分(fēn)藥品研究單位對雜(zá)質研究的重要性了解不深；标準中(zhōng)對雜(zá)質的控制不夠全面與準确；制訂雜(zá)質限度時考慮問題不夠全面，很少考慮雜(zá)質對藥品安全性的不良影響；即使在雜(zá)質的含量明顯超出正常工(gōng)藝所允許的範圍時，也不注意對現有的處方與工(gōng)藝進行必要的優化，以降低雜(zá)質的限度。

  ◆雜(zá)質的分(fēn)類　藥品中(zhōng)的雜(zá)質一(yī)般分(fēn)爲三類：有機雜(zá)質、無機雜(zá)質及殘留溶劑
  有機雜(zá)質是指在藥品的生(shēng)産與儲存過程中(zhōng)産生(shēng)的雜(zá)質，這些雜(zá)質可以是已知(zhī)的、未知(zhī)的、揮發性的或不揮發性的雜(zá)質，主要包括：降解産物(wù)、聚合物(wù)、原料藥與輔料或内包材的反應産物(wù)、以及原料藥制備過程中(zhōng)引入的起始原料、副産物(wù)、中(zhōng)間體(tǐ)、反應試劑、配位體(tǐ)與催化劑。由于這些雜(zá)質的化學結構與産品分(fēn)子類似或具淵源關系，所以通常稱之爲有關物(wù)質。 　　

  無機雜(zá)質是指在藥品的生(shēng)産過程中(zhōng)産生(shēng)的雜(zá)質，這些雜(zá)質通常是已知(zhī)的，主要包括：反應試劑、配位體(tǐ)與催化劑、重金屬或其它殘留的金屬、無機鹽、過濾助劑、活性炭等其它物(wù)質。

  殘留溶劑是指在原料藥及制劑的生(shēng)産過程中(zhōng)使用的有機溶劑。 對于生(shēng)産過程中(zhōng)引入的外(wài)來污染物(wù)，可通過“良好的生(shēng)産規範”（GMP）來控制，故不屬于本文所說的雜(zá)質範疇。原料藥的不同晶型也不屬于本文的讨論範疇。本文隻談有機雜(zá)質與無機雜(zá)質的限度确定。

  ◆有機雜(zá)質限度的确定
  總的來說，在制訂質量标準中(zhōng)雜(zá)質的限度時，應考慮以下(xià)因素：首先是雜(zá)質的安全性，尤其是對于有藥理活性或毒性的雜(zá)質；其次是生(shēng)産的可行性與正常的波動範圍；另外(wài)，還要考慮藥品本身的穩定性。由于創新藥與仿制藥在研究思路上的差異，雜(zá)質限度的确定方法也不同。
 

  一(yī)、創新藥
  在此，創新藥是指國内外(wài)均未上市、而完全以自己的研究結果來申報的新的化學實體(tǐ)及其制劑。按照新藥研發的一(yī)般模式，此類創新藥的研發一(yī)般需經過化合物(wù)的合成、藥效學初篩、較大(dà)規模的合成、毒理研究、制劑研究、臨床研究、原料藥與制劑工(gōng)藝的優化等一(yī)系列步驟。雜(zá)質的研究工(gōng)作将貫穿于藥品研發的整個過程，其限度的确定與毒理研究及臨床研究的結果息息相關。 　　

  在創新藥的研究中(zhōng)，需通過一(yī)系列的藥理毒理及臨床研究來驗證該藥品的安全有效性，而研究所用的樣品就包含一(yī)定種類與數量的雜(zá)質，如果在這些研究中(zhōng)并未反映出明顯的毒副作用，或經分(fēn)析認定該毒副作用與雜(zá)質無關，則在安全性方面可認爲該雜(zá)質的限度已經過了合理的驗證。如果該雜(zá)質的含量同時也在正常的制備工(gōng)藝所允許的範圍内，則根據試驗樣品中(zhōng)該雜(zá)質的含量所确定的限度可認爲是合理的。并且随着研究工(gōng)作的逐步深入，制備工(gōng)藝的優化，産品純度會越來越高。申報上市時雜(zá)質的限度已遠低于研究初期雜(zá)質的含量，再結合穩定性考察中(zhōng)效期末産品的雜(zá)質情況來确定雜(zá)質限度，其依據就比較充分(fēn)，患者用藥的安全性也就更有保障。 　　

  所以對于創新藥，可通過以下(xià)步驟來确定雜(zá)質的限度。如果在安全性研究與臨床研究中(zhōng)，并未反映出雜(zá)質具有明顯的毒副作用，則在制定雜(zá)質限度時隻需考慮生(shēng)産與穩定性的結果。具體(tǐ)如下(xià)：首先應選用合适的分(fēn)析方法對所有批次産品的雜(zá)質進行檢測，并完整地記錄各批次樣品的批号與批量、生(shēng)産日期與地點、生(shēng)産工(gōng)藝、單個雜(zá)質及總雜(zá)質的含量、産品的用途（如臨床研究，急毒、長毒研究，穩定性研究等），對于制劑，還應包括原料藥的批号等。爲了使以上批次的産品更有代表性，除了要提供所有小(xiǎo)試規模的産品外(wài)，至少還應包括一(yī)定數量中(zhōng)試規模的産品，然後對工(gōng)藝基本穩定以後的産品的雜(zá)質進行統計處理，計算出雜(zá)質含量的标準偏差值。一(yī)般認爲，标準偏差三倍以内的雜(zá)質含量的變化都在正常的波動範圍内。再根據穩定性考察的數據确定出雜(zá)質的限度。隻要該限度不大(dà)于安全性研究與臨床研究用樣品的雜(zá)質含量，這一(yī)限度就是安全的，也是合理的。 　　

  如果安全性研究或臨床研究反映出雜(zá)質具有明顯的毒副作用，則該雜(zá)質的限度将隻能根據安全性研究的結果制訂，并根據該雜(zá)質的來源，采取相應的措施盡量降低其含量。 　　

  爲了使大(dà)家了解國際上對此問題的常規要求，在此簡單介紹“人用藥品注冊技術要求國際協調會”（ICH）的有關指導原則。ICH在2002年2月7日修訂的“新原料藥中(zhōng)的雜(zá)質”指導原則，根據原料藥的每日最大(dà)劑量将原料藥分(fēn)爲兩類，并分(fēn)别制訂了雜(zá)質的報告阈值、鑒定阈值與合理限度。其中(zhōng)的報告阈值是指所有高于此阈值的雜(zá)質及含量均應記入每批産品的檢驗報告中(zhōng)，并反映在申報資(zī)料中(zhōng)。而鑒定阈值是指所有高于此阈值的雜(zá)質均應對其結構進行确證。合理限度是指隻要質量标準中(zhōng)制訂的雜(zá)質限度不高于此限度，就不需要提供該限度的制訂依據，均認爲該限度是合理的。具體(tǐ)規定如下(xià)：
  每日最大(dà)劑量 報告阈值 鑒定阈值 合理限度 
  ≤2g 0.05% 0.10%或1.0mg(取較低值) 0.10%或1.0mg(取較低值)

  >2g 0.03% 0.05% 0.05%  　　

  對于新藥制劑，ICH在2003年2月5日修訂的“新制劑中(zhōng)的雜(zá)質”指導原則中(zhōng)也做了明确規定。該指導原則同樣根據不同的用藥劑量制訂了雜(zá)質的報告阈值、鑒定阈值與合理限度。

  具體(tǐ)如下(xià)：
  報告阈值 
  每日最大(dà)劑量阈值 
  ≤1g 0.1% 
  >1g 0.05% 
  鑒定阈值 
  每日最大(dà)劑量阈值 
  <1mg1.0%或 5ug (取其中(zhōng)較低的值) 
  1mg-10mg 0.5%或 20ug (取其中(zhōng)較低的值)
  10mg-2g 0.2% 或 2mg (取其中(zhōng)較低的值) 
  >2g 0.10% 
  合理限度 
  每日最大(dà)劑量阈值 
  <10mg 1.0%或 50ug (取其中(zhōng)較低的值)
  10mg-100mg 0.5%或 200ug (取其中(zhōng)較低的值)
  100mg-2g 0.2%或 3mg (取其中(zhōng)較低的值)
  >2g 0.15% 

  二、已有國家标準的藥品及改劑型藥品 由于已有國家标準的藥品及改劑型藥品是在已有同一(yī)品種或含有同一(yī)活性成分(fēn)的其它制劑上市的前提下(xià)進行仿制或研究的，按照我(wǒ)國的藥品注冊管理辦法，根據具體(tǐ)的注冊分(fēn)類在申報注冊時，可以免做部分(fēn)藥理毒理研究及臨床研究，所以在制訂這些藥品的雜(zá)質限度時，方法與創新藥有所不同。具體(tǐ)可根據已有标準的不同分(fēn)爲以下(xià)四種情況： 　　

  已上市産品标準中(zhōng)對雜(zá)質有明确規定。在仿制時可以按照已有的标準制定雜(zá)質的限度。但也要注意：不同的合成路線會産生(shēng)不同的雜(zá)質；不同的制劑處方與工(gōng)藝導緻産品的穩定性也可能不一(yī)緻；不同輔料的幹擾，采用的雜(zá)質檢測方法也可能不同。在這些情況下(xià)就不能簡單地仿标準，而應在質量研究時進行全面的分(fēn)析：注意考察已有标準中(zhōng)方法是否仍然适用，是否有新的雜(zá)質産生(shēng)。爲避免因使用不同的合成路線而産生(shēng)不同的雜(zá)質，國外(wài)在研究仿制藥時，有時會采用反向工(gōng)程（reverseEngineering）的方式，通過對已上市藥品的雜(zá)質進行研究，推斷其合成路線，然後采用相同的路線制備仿制藥，從而較好地解決了這一(yī)問題。 　　

  對于改劑型藥品，仍可根據同一(yī)給藥途徑的産品标準來制定其雜(zá)質限度；如無同一(yī)給藥途徑的标準，則可參考其它的給藥途徑的産品标準來制定合理的雜(zá)質限度。 　　

  已上市産品的标準中(zhōng)對雜(zá)質沒有明确規定。此時一(yī)定要注意，此種情況并不意味着該産品的純度不需要控制。在正常情況下(xià)，對原料藥來說，在質量标準中(zhōng)都應有雜(zá)質控制項目；對制劑，如果制劑用原料藥的雜(zá)質已有嚴格的控制，并且在制劑的制備與放(fàng)置過程中(zhōng)已證明雜(zá)質的種類與含量均沒有變化，則制劑的質量标準中(zhōng)就可以不再制訂雜(zá)質檢查項目。當然也不排除該産品在研究與技術審評過程中(zhōng)，因要求不夠嚴格而沒有按質控的要求訂入合适的雜(zá)質檢查項。 　　

  對于這種情況，就不能簡單地仿标準，而應根據原料藥的雜(zá)質情況、制劑的制備與穩定性考察中(zhōng)雜(zá)質的種類與含量有無變化等來确定是否有必要在制劑的質量标準中(zhōng)控制雜(zá)質。如有必要，則可通過仿産品來确定雜(zá)質的限度。由于已上市的同品種藥品的質量不完全相同，我(wǒ)們在選擇仿制的參考品時，一(yī)定要注意所仿制産品的質量，必要時可多選擇幾種産品進行質量對比研究。考慮到已上市産品已在臨床上使用，如無明顯的與雜(zá)質有關的毒副作用，其安全性已得到一(yī)定程度的臨床驗證，該産品中(zhōng)的雜(zá)質限度可認爲是合理的。通過對已上市藥品中(zhōng)的雜(zá)質進行全面分(fēn)析，以此爲依據來确定仿制藥或改劑型藥的雜(zá)質限度。一(yī)般來說，由于已上市的同品種藥品的質量标準中(zhōng)制訂的雜(zá)質限度要高于産品的實測值，并且産品的原發廠在進行安全性研究時的實際劑量遠大(dà)于規定的限度，所以根據FDA指導原則中(zhōng)的有關規定，可将在研産品的雜(zá)質限度設定爲已上市的同品種藥品雜(zá)質實測值的兩倍以内。在此還應注意，如果給藥途徑不同，限度可能會有所不同。 　　

  得不到上市産品的标準。對原料藥來說，由于一(yī)般都應在标準中(zhōng)控制雜(zá)質，所以就要通過仿已上市産品來确定雜(zá)質的限度。對于制劑，則應先根據原料藥的雜(zá)質情況、制劑的制備與穩定性考察中(zhōng)雜(zá)質的種類與含量有無變化等來确定是否有必要在制劑的質量标準中(zhōng)控制雜(zá)質。如有必要，則可通過仿産品來确定雜(zá)質的限度。 　　

  仿制品或改劑型産品與參考品的雜(zá)質種類不一(yī)緻，或雜(zá)質含量大(dà)于已上市的參考品雜(zá)質的實測值的兩倍。應該分(fēn)析原因，有針對性地對制備工(gōng)藝與處方等進行優化，使雜(zá)質的種類與含量符合要求；或者按照一(yī)定程序，通過必要的安全性試驗來證明現有雜(zá)質的種類與含量是安全的。 　　

  總之，在确定已有國家标準的藥品及改劑型藥品的雜(zá)質限度時，主要的參考依據應該是已上市的産品。在制訂雜(zá)質限度時隻有通過比較全面的論證與研究，所訂的限度才能更科學合理，産品的安全性才更有保證。

  ◆無機雜(zá)質限度的确定
  在雜(zá)質研究時應根據具體(tǐ)的生(shēng)産工(gōng)藝，對原料藥制備過程中(zhōng)涉及到的無機物(wù)進行檢測，通常采用藥典方法或其它合适的方法進行檢測與定量。根據整個研發過程中(zhōng)生(shēng)産的小(xiǎo)試、中(zhōng)試樣品的實測情況，對催化劑、重金屬等無機雜(zá)質是否會帶入成品中(zhōng)進行評估，并就質量标準中(zhōng)是否納入這些無機雜(zá)質進行必要的讨論說明，提供相關的試驗依據與文獻依據。　　

  無機雜(zá)質的限度主要根據該雜(zá)質的毒性及各批次産品的實測結果而定。如果某些産品的無機雜(zá)質在放(fàng)置過程中(zhōng)會增加，則制訂該雜(zá)質的限度時，還應綜合考慮穩定性考察的結果。 　　

  各國藥典收載的質量标準及我(wǒ)國已批準上市的産品的注冊标準中(zhōng)包含有各類無機雜(zá)質的限度，在這些限度以内的無機雜(zá)質可以認爲其安全性已得到了确認。因此，這些限度對于我(wǒ)們确定新産品的無機雜(zá)質限度具有很強的參考價值。此時要注意根據新産品的給藥途徑、适應症以及用量等選擇合适的參考标準，以使限度的制訂更爲合理