藥物(wù)研發中(zhōng)如何确定創新(xīn)藥及仿制藥雜質(zhì)限度

  在藥品研發中(zhōng)，如何證實藥品安(ān)全有(yǒu)效應該是研發人員始終關注的問題；而藥品質(zhì)量的穩定可(kě)控又(yòu)是保證其安(ān)全有(yǒu)效的前提與基礎。如果一個藥品的質(zhì)量不能(néng)達到穩定與可(kě)控，在使用(yòng)時這一藥品就不可(kě)能(néng)始終安(ān)全、有(yǒu)效，也就不能(néng)被批準上市。保證藥品質(zhì)量穩定可(kě)控，藥品的純度是一個重點。如何确定雜質(zhì)的限度是藥學(xué)研究人員與審評人員不能(néng)回避的關鍵問題，該限度的制訂是否科(kē)學(xué)、合理(lǐ)，直接關系到藥品的安(ān)全性與質(zhì)量。藥品在臨床使用(yòng)中(zhōng)産(chǎn)生的不良反應除與該藥品本身的藥理(lǐ)活性有(yǒu)關外，也有(yǒu)一部分(fēn)與藥品中(zhōng)所混入的其它雜質(zhì)有(yǒu)關。例如，通過我國(guó)藥學(xué)科(kē)技(jì )工(gōng)作(zuò)者數十年的努力，基本上确定青黴素等抗生素中(zhōng)的多(duō)聚物(wù)等高分(fēn)子雜質(zhì)是引起過敏的主要原因。所以在研發過程中(zhōng)一定要對藥品中(zhōng)的雜質(zhì)進行全面研究，并将雜質(zhì)完全準确地控制在一個合理(lǐ)的範圍之内。
  盡管雜質(zhì)限度的确定對于藥品研發非常重要，但國(guó)内藥品研發的現實情況并不令人樂觀。從近幾年的新(xīn)藥申報情況分(fēn)析，在雜質(zhì)的研究與限度确定方面存在着較多(duō)的問題，主要表現為(wèi)：部分(fēn)藥品研究單位對雜質(zhì)研究的重要性了解不深；标準中(zhōng)對雜質(zhì)的控制不夠全面與準确；制訂雜質(zhì)限度時考慮問題不夠全面，很(hěn)少考慮雜質(zhì)對藥品安(ān)全性的不良影響；即使在雜質(zhì)的含量明顯超出正常工(gōng)藝所允許的範圍時，也不注意對現有(yǒu)的處方與工(gōng)藝進行必要的優化，以降低雜質(zhì)的限度。

  ◆雜質(zhì)的分(fēn)類　藥品中(zhōng)的雜質(zhì)一般分(fēn)為(wèi)三類：有(yǒu)機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)及殘留溶劑
  有(yǒu)機雜質(zhì)是指在藥品的生産(chǎn)與儲存過程中(zhōng)産(chǎn)生的雜質(zhì)，這些雜質(zhì)可(kě)以是已知的、未知的、揮發性的或不揮發性的雜質(zhì)，主要包括：降解産(chǎn)物(wù)、聚合物(wù)、原料藥與輔料或内包材的反應産(chǎn)物(wù)、以及原料藥制備過程中(zhōng)引入的起始原料、副産(chǎn)物(wù)、中(zhōng)間體(tǐ)、反應試劑、配位體(tǐ)與催化劑。由于這些雜質(zhì)的化學(xué)結構與産(chǎn)品分(fēn)子類似或具(jù)淵源關系，所以通常稱之為(wèi)有(yǒu)關物(wù)質(zhì)。 　　

  無機雜質(zhì)是指在藥品的生産(chǎn)過程中(zhōng)産(chǎn)生的雜質(zhì)，這些雜質(zhì)通常是已知的，主要包括：反應試劑、配位體(tǐ)與催化劑、重金屬或其它殘留的金屬、無機鹽、過濾助劑、活性炭等其它物(wù)質(zhì)。

  殘留溶劑是指在原料藥及制劑的生産(chǎn)過程中(zhōng)使用(yòng)的有(yǒu)機溶劑。 對于生産(chǎn)過程中(zhōng)引入的外來污染物(wù)，可(kě)通過“良好的生産(chǎn)規範”（GMP）來控制，故不屬于本文(wén)所說的雜質(zhì)範疇。原料藥的不同晶型也不屬于本文(wén)的讨論範疇。本文(wén)隻談有(yǒu)機雜質(zhì)與無機雜質(zhì)的限度确定。

  ◆有(yǒu)機雜質(zhì)限度的确定
  總的來說，在制訂質(zhì)量标準中(zhōng)雜質(zhì)的限度時，應考慮以下因素：首先是雜質(zhì)的安(ān)全性，尤其是對于有(yǒu)藥理(lǐ)活性或毒性的雜質(zhì)；其次是生産(chǎn)的可(kě)行性與正常的波動範圍；另外，還要考慮藥品本身的穩定性。由于創新(xīn)藥與仿制藥在研究思路上的差異，雜質(zhì)限度的确定方法也不同。
 

  一、創新(xīn)藥
  在此，創新(xīn)藥是指國(guó)内外均未上市、而完全以自己的研究結果來申報的新(xīn)的化學(xué)實體(tǐ)及其制劑。按照新(xīn)藥研發的一般模式，此類創新(xīn)藥的研發一般需經過化合物(wù)的合成、藥效學(xué)初篩、較大規模的合成、毒理(lǐ)研究、制劑研究、臨床研究、原料藥與制劑工(gōng)藝的優化等一系列步驟。雜質(zhì)的研究工(gōng)作(zuò)将貫穿于藥品研發的整個過程，其限度的确定與毒理(lǐ)研究及臨床研究的結果息息相關。 　　

  在創新(xīn)藥的研究中(zhōng)，需通過一系列的藥理(lǐ)毒理(lǐ)及臨床研究來驗證該藥品的安(ān)全有(yǒu)效性，而研究所用(yòng)的樣品就包含一定種類與數量的雜質(zhì)，如果在這些研究中(zhōng)并未反映出明顯的毒副作(zuò)用(yòng)，或經分(fēn)析認定該毒副作(zuò)用(yòng)與雜質(zhì)無關，則在安(ān)全性方面可(kě)認為(wèi)該雜質(zhì)的限度已經過了合理(lǐ)的驗證。如果該雜質(zhì)的含量同時也在正常的制備工(gōng)藝所允許的範圍内，則根據試驗樣品中(zhōng)該雜質(zhì)的含量所确定的限度可(kě)認為(wèi)是合理(lǐ)的。并且随着研究工(gōng)作(zuò)的逐步深入，制備工(gōng)藝的優化，産(chǎn)品純度會越來越高。申報上市時雜質(zhì)的限度已遠(yuǎn)低于研究初期雜質(zhì)的含量，再結合穩定性考察中(zhōng)效期末産(chǎn)品的雜質(zhì)情況來确定雜質(zhì)限度，其依據就比較充分(fēn)，患者用(yòng)藥的安(ān)全性也就更有(yǒu)保障。 　　

  所以對于創新(xīn)藥，可(kě)通過以下步驟來确定雜質(zhì)的限度。如果在安(ān)全性研究與臨床研究中(zhōng)，并未反映出雜質(zhì)具(jù)有(yǒu)明顯的毒副作(zuò)用(yòng)，則在制定雜質(zhì)限度時隻需考慮生産(chǎn)與穩定性的結果。具(jù)體(tǐ)如下：首先應選用(yòng)合适的分(fēn)析方法對所有(yǒu)批次産(chǎn)品的雜質(zhì)進行檢測，并完整地記錄各批次樣品的批号與批量、生産(chǎn)日期與地點、生産(chǎn)工(gōng)藝、單個雜質(zhì)及總雜質(zhì)的含量、産(chǎn)品的用(yòng)途（如臨床研究，急毒、長(cháng)毒研究，穩定性研究等），對于制劑，還應包括原料藥的批号等。為(wèi)了使以上批次的産(chǎn)品更有(yǒu)代表性，除了要提供所有(yǒu)小(xiǎo)試規模的産(chǎn)品外，至少還應包括一定數量中(zhōng)試規模的産(chǎn)品，然後對工(gōng)藝基本穩定以後的産(chǎn)品的雜質(zhì)進行統計處理(lǐ)，計算出雜質(zhì)含量的标準偏差值。一般認為(wèi)，标準偏差三倍以内的雜質(zhì)含量的變化都在正常的波動範圍内。再根據穩定性考察的數據确定出雜質(zhì)的限度。隻要該限度不大于安(ān)全性研究與臨床研究用(yòng)樣品的雜質(zhì)含量，這一限度就是安(ān)全的，也是合理(lǐ)的。 　　

  如果安(ān)全性研究或臨床研究反映出雜質(zhì)具(jù)有(yǒu)明顯的毒副作(zuò)用(yòng)，則該雜質(zhì)的限度将隻能(néng)根據安(ān)全性研究的結果制訂，并根據該雜質(zhì)的來源，采取相應的措施盡量降低其含量。 　　

  為(wèi)了使大家了解國(guó)際上對此問題的常規要求，在此簡單介紹“人用(yòng)藥品注冊技(jì )術要求國(guó)際協調會”（ICH）的有(yǒu)關指導原則。ICH在2002年2月7日修訂的“新(xīn)原料藥中(zhōng)的雜質(zhì)”指導原則，根據原料藥的每日最大劑量将原料藥分(fēn)為(wèi)兩類，并分(fēn)别制訂了雜質(zhì)的報告阈值、鑒定阈值與合理(lǐ)限度。其中(zhōng)的報告阈值是指所有(yǒu)高于此阈值的雜質(zhì)及含量均應記入每批産(chǎn)品的檢驗報告中(zhōng)，并反映在申報資料中(zhōng)。而鑒定阈值是指所有(yǒu)高于此阈值的雜質(zhì)均應對其結構進行确證。合理(lǐ)限度是指隻要質(zhì)量标準中(zhōng)制訂的雜質(zhì)限度不高于此限度，就不需要提供該限度的制訂依據，均認為(wèi)該限度是合理(lǐ)的。具(jù)體(tǐ)規定如下：
  每日最大劑量 報告阈值 鑒定阈值 合理(lǐ)限度 
  ≤2g 0.05% 0.10%或1.0mg(取較低值) 0.10%或1.0mg(取較低值)

  >2g 0.03% 0.05% 0.05%  　　

  對于新(xīn)藥制劑，ICH在2003年2月5日修訂的“新(xīn)制劑中(zhōng)的雜質(zhì)”指導原則中(zhōng)也做了明确規定。該指導原則同樣根據不同的用(yòng)藥劑量制訂了雜質(zhì)的報告阈值、鑒定阈值與合理(lǐ)限度。

  具(jù)體(tǐ)如下：
  報告阈值 
  每日最大劑量阈值 
  ≤1g 0.1% 
  >1g 0.05% 
  鑒定阈值 
  每日最大劑量阈值 
  <1mg1.0%或 5ug (取其中(zhōng)較低的值) 
  1mg-10mg 0.5%或 20ug (取其中(zhōng)較低的值)
  10mg-2g 0.2% 或 2mg (取其中(zhōng)較低的值) 
  >2g 0.10% 
  合理(lǐ)限度 
  每日最大劑量阈值 
  <10mg 1.0%或 50ug (取其中(zhōng)較低的值)
  10mg-100mg 0.5%或 200ug (取其中(zhōng)較低的值)
  100mg-2g 0.2%或 3mg (取其中(zhōng)較低的值)
  >2g 0.15% 

  二、已有(yǒu)國(guó)家标準的藥品及改劑型藥品 由于已有(yǒu)國(guó)家标準的藥品及改劑型藥品是在已有(yǒu)同一品種或含有(yǒu)同一活性成分(fēn)的其它制劑上市的前提下進行仿制或研究的，按照我國(guó)的藥品注冊管理(lǐ)辦(bàn)法，根據具(jù)體(tǐ)的注冊分(fēn)類在申報注冊時，可(kě)以免做部分(fēn)藥理(lǐ)毒理(lǐ)研究及臨床研究，所以在制訂這些藥品的雜質(zhì)限度時，方法與創新(xīn)藥有(yǒu)所不同。具(jù)體(tǐ)可(kě)根據已有(yǒu)标準的不同分(fēn)為(wèi)以下四種情況： 　　

  已上市産(chǎn)品标準中(zhōng)對雜質(zhì)有(yǒu)明确規定。在仿制時可(kě)以按照已有(yǒu)的标準制定雜質(zhì)的限度。但也要注意：不同的合成路線(xiàn)會産(chǎn)生不同的雜質(zhì)；不同的制劑處方與工(gōng)藝導緻産(chǎn)品的穩定性也可(kě)能(néng)不一緻；不同輔料的幹擾，采用(yòng)的雜質(zhì)檢測方法也可(kě)能(néng)不同。在這些情況下就不能(néng)簡單地仿标準，而應在質(zhì)量研究時進行全面的分(fēn)析：注意考察已有(yǒu)标準中(zhōng)方法是否仍然适用(yòng)，是否有(yǒu)新(xīn)的雜質(zhì)産(chǎn)生。為(wèi)避免因使用(yòng)不同的合成路線(xiàn)而産(chǎn)生不同的雜質(zhì)，國(guó)外在研究仿制藥時，有(yǒu)時會采用(yòng)反向工(gōng)程（reverseEngineering）的方式，通過對已上市藥品的雜質(zhì)進行研究，推斷其合成路線(xiàn)，然後采用(yòng)相同的路線(xiàn)制備仿制藥，從而較好地解決了這一問題。 　　

  對于改劑型藥品，仍可(kě)根據同一給藥途徑的産(chǎn)品标準來制定其雜質(zhì)限度；如無同一給藥途徑的标準，則可(kě)參考其它的給藥途徑的産(chǎn)品标準來制定合理(lǐ)的雜質(zhì)限度。 　　

  已上市産(chǎn)品的标準中(zhōng)對雜質(zhì)沒有(yǒu)明确規定。此時一定要注意，此種情況并不意味着該産(chǎn)品的純度不需要控制。在正常情況下，對原料藥來說，在質(zhì)量标準中(zhōng)都應有(yǒu)雜質(zhì)控制項目；對制劑，如果制劑用(yòng)原料藥的雜質(zhì)已有(yǒu)嚴格的控制，并且在制劑的制備與放置過程中(zhōng)已證明雜質(zhì)的種類與含量均沒有(yǒu)變化，則制劑的質(zhì)量标準中(zhōng)就可(kě)以不再制訂雜質(zhì)檢查項目。當然也不排除該産(chǎn)品在研究與技(jì )術審評過程中(zhōng)，因要求不夠嚴格而沒有(yǒu)按質(zhì)控的要求訂入合适的雜質(zhì)檢查項。 　　

  對于這種情況，就不能(néng)簡單地仿标準，而應根據原料藥的雜質(zhì)情況、制劑的制備與穩定性考察中(zhōng)雜質(zhì)的種類與含量有(yǒu)無變化等來确定是否有(yǒu)必要在制劑的質(zhì)量标準中(zhōng)控制雜質(zhì)。如有(yǒu)必要，則可(kě)通過仿産(chǎn)品來确定雜質(zhì)的限度。由于已上市的同品種藥品的質(zhì)量不完全相同，我們在選擇仿制的參考品時，一定要注意所仿制産(chǎn)品的質(zhì)量，必要時可(kě)多(duō)選擇幾種産(chǎn)品進行質(zhì)量對比研究。考慮到已上市産(chǎn)品已在臨床上使用(yòng)，如無明顯的與雜質(zhì)有(yǒu)關的毒副作(zuò)用(yòng)，其安(ān)全性已得到一定程度的臨床驗證，該産(chǎn)品中(zhōng)的雜質(zhì)限度可(kě)認為(wèi)是合理(lǐ)的。通過對已上市藥品中(zhōng)的雜質(zhì)進行全面分(fēn)析，以此為(wèi)依據來确定仿制藥或改劑型藥的雜質(zhì)限度。一般來說，由于已上市的同品種藥品的質(zhì)量标準中(zhōng)制訂的雜質(zhì)限度要高于産(chǎn)品的實測值，并且産(chǎn)品的原發廠在進行安(ān)全性研究時的實際劑量遠(yuǎn)大于規定的限度，所以根據FDA指導原則中(zhōng)的有(yǒu)關規定，可(kě)将在研産(chǎn)品的雜質(zhì)限度設定為(wèi)已上市的同品種藥品雜質(zhì)實測值的兩倍以内。在此還應注意，如果給藥途徑不同，限度可(kě)能(néng)會有(yǒu)所不同。 　　

  得不到上市産(chǎn)品的标準。對原料藥來說，由于一般都應在标準中(zhōng)控制雜質(zhì)，所以就要通過仿已上市産(chǎn)品來确定雜質(zhì)的限度。對于制劑，則應先根據原料藥的雜質(zhì)情況、制劑的制備與穩定性考察中(zhōng)雜質(zhì)的種類與含量有(yǒu)無變化等來确定是否有(yǒu)必要在制劑的質(zhì)量标準中(zhōng)控制雜質(zhì)。如有(yǒu)必要，則可(kě)通過仿産(chǎn)品來确定雜質(zhì)的限度。 　　

  仿制品或改劑型産(chǎn)品與參考品的雜質(zhì)種類不一緻，或雜質(zhì)含量大于已上市的參考品雜質(zhì)的實測值的兩倍。應該分(fēn)析原因，有(yǒu)針對性地對制備工(gōng)藝與處方等進行優化，使雜質(zhì)的種類與含量符合要求；或者按照一定程序，通過必要的安(ān)全性試驗來證明現有(yǒu)雜質(zhì)的種類與含量是安(ān)全的。 　　

  總之，在确定已有(yǒu)國(guó)家标準的藥品及改劑型藥品的雜質(zhì)限度時，主要的參考依據應該是已上市的産(chǎn)品。在制訂雜質(zhì)限度時隻有(yǒu)通過比較全面的論證與研究，所訂的限度才能(néng)更科(kē)學(xué)合理(lǐ)，産(chǎn)品的安(ān)全性才更有(yǒu)保證。

  ◆無機雜質(zhì)限度的确定
  在雜質(zhì)研究時應根據具(jù)體(tǐ)的生産(chǎn)工(gōng)藝，對原料藥制備過程中(zhōng)涉及到的無機物(wù)進行檢測，通常采用(yòng)藥典方法或其它合适的方法進行檢測與定量。根據整個研發過程中(zhōng)生産(chǎn)的小(xiǎo)試、中(zhōng)試樣品的實測情況，對催化劑、重金屬等無機雜質(zhì)是否會帶入成品中(zhōng)進行評估，并就質(zhì)量标準中(zhōng)是否納入這些無機雜質(zhì)進行必要的讨論說明，提供相關的試驗依據與文(wén)獻依據。　　

  無機雜質(zhì)的限度主要根據該雜質(zhì)的毒性及各批次産(chǎn)品的實測結果而定。如果某些産(chǎn)品的無機雜質(zhì)在放置過程中(zhōng)會增加，則制訂該雜質(zhì)的限度時，還應綜合考慮穩定性考察的結果。 　　

  各國(guó)藥典收載的質(zhì)量标準及我國(guó)已批準上市的産(chǎn)品的注冊标準中(zhōng)包含有(yǒu)各類無機雜質(zhì)的限度，在這些限度以内的無機雜質(zhì)可(kě)以認為(wèi)其安(ān)全性已得到了确認。因此，這些限度對于我們确定新(xīn)産(chǎn)品的無機雜質(zhì)限度具(jù)有(yǒu)很(hěn)強的參考價值。此時要注意根據新(xīn)産(chǎn)品的給藥途徑、适應症以及用(yòng)量等選擇合适的參考标準，以使限度的制訂更為(wèi)合理(lǐ)