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QC必備的四大知識闆塊

發布時間：2021-07-21

真正的分(fēn)析實驗員一定是肚子裏有(yǒu)幹貨、有(yǒu)墨水哒！今天，為(wèi)小(xiǎo)夥伴們梳理(lǐ)幾組概念，不熟悉或者已然熟悉的小(xiǎo)夥伴不妨來看看。内容涵蓋分(fēn)離分(fēn)析導論、氣相色譜法、高效液相色譜法和質(zhì)譜分(fēn)析法四大闆塊。
    

 
一

 

分(fēn)離分(fēn)析法導論

 

1、色譜分(fēn)析法
色譜法是一種分(fēn)離分(fēn)析方法。它利用(yòng)樣品中(zhōng)各組分(fēn)與流動相和固定相的作(zuò)用(yòng)力不同（吸附、分(fēn)配、交換等性能(néng)上的差異），先将它們分(fēn)離，後按一定順序檢測各組分(fēn)及其含量的方法。
 
2、色譜法的分(fēn)離原理(lǐ)
當混合物(wù)随流動相流經色譜柱時，就會與柱中(zhōng)固定相發生作(zuò)用(yòng)（溶解、吸附等），由于混合物(wù)中(zhōng)各組分(fēn)物(wù)理(lǐ)化學(xué)性質(zhì)和結構上的差異，與固定相發生作(zuò)用(yòng)的大小(xiǎo)、強弱不同，在同一推動力作(zuò)用(yòng)下，各組分(fēn)在固定相中(zhōng)的滞留時間不同，從而使混合物(wù)中(zhōng)各組分(fēn)按一定順序從柱中(zhōng)流出。這種利用(yòng)各組分(fēn)在兩相中(zhōng)性能(néng)上的差異，使混合物(wù)中(zhōng)各組分(fēn)分(fēn)離的技(jì )術，稱為(wèi)色譜法。
 
3、流動相
色譜分(fēn)離過程中(zhōng)攜帶組分(fēn)向前移動的物(wù)質(zhì)。
 
4、固定相
色譜分(fēn)離過程中(zhōng)不移動的具(jù)有(yǒu)吸附活性的固體(tǐ)或是塗漬在載體(tǐ)表面的液體(tǐ)。
 
5、色譜法的特點
（1）分(fēn)離效率高，複雜混合物(wù)，有(yǒu)機同系物(wù)、異構體(tǐ)。
（2）靈敏度高，可(kě)以檢測出μg.g-1(10-6)級甚至ng.g-1(10-9)級的物(wù)質(zhì)量。
（3）分(fēn)析速度快，一般在幾分(fēn)鍾或幾十分(fēn)鍾内可(kě)以完成一個試樣的分(fēn)析。
（4）應用(yòng)範圍廣，氣相色譜：沸點低于400℃的各種有(yǒu)機或無機試樣的分(fēn)析。液相色譜：高沸點、熱不穩定、生物(wù)試樣的分(fēn)離分(fēn)析。
  (5) 高選擇性：對性質(zhì)極為(wèi)相似的組分(fēn)有(yǒu)很(hěn)強的分(fēn)離能(néng)力。
不足之處：被分(fēn)離組分(fēn)的定性較為(wèi)困難。
 
6、色譜分(fēn)析法的分(fēn)類
按兩相狀态分(fēn)類，按操作(zuò)形式分(fēn)類，按分(fēn)離原理(lǐ)分(fēn)類。
（1）按兩相狀态分(fēn)類：
氣相色譜(Gas Chromatography, GC)，液相色譜(Liquid Chromatography, LC)，超臨界流體(tǐ)色譜 (Supercritical Fluid Chromatography, SFC)。
氣相色譜：流動相為(wèi)氣體(tǐ)（稱為(wèi)載氣）。常用(yòng)的氣相色譜流動相有(yǒu)N2、H2、He等氣體(tǐ)。
按分(fēn)離柱不同可(kě)分(fēn)為(wèi)：填充柱色譜和毛細管柱色譜；按
固定相的不同又(yòu)分(fēn)為(wèi)：氣固色譜和氣液色譜。
液相色譜：流動相為(wèi)液體(tǐ)（也稱為(wèi)淋洗液）。
按固定相的不同分(fēn)為(wèi)：液固色譜和液液色譜。
超臨界流體(tǐ)色譜：流動相為(wèi)超臨界流體(tǐ)。
超臨界流體(tǐ)是一種介于氣體(tǐ)和液體(tǐ)之間的狀态。超臨界流體(tǐ)色譜法是集氣相色譜法和液相色譜法的優勢而發展起來的一種新(xīn)型的色譜分(fēn)離分(fēn)析技(jì )術，不僅能(néng)夠分(fēn)析氣相色譜不宜分(fēn)析的高沸點、低揮發性的試樣組分(fēn)，而且具(jù)有(yǒu)比高效液相色譜更快的分(fēn)析速率和更高的柱效率。
 
（2）按操作(zuò)形式分(fēn)類：
柱色譜(Column Chromatography, CC)：固定相裝(zhuāng)在柱管内；包括填充柱色譜和毛細管柱色譜。紙色譜(Paper Chromatography, PC)固定相為(wèi)濾紙；采用(yòng)适當溶劑使樣品在濾紙上展開而進行分(fēn)離。薄層色譜(Thin Layer Chromatography, TLC)
固定相壓成或塗成薄層；操作(zuò)方法同紙色譜。
 
（3）按分(fēn)離原理(lǐ)分(fēn)類：
吸附色譜(Absorption chromatography)；
分(fēn)配色譜(Partition Chromatography)；
離子交換色譜(Ion Exchange Chromatography)；
凝膠色譜(Gel Chromatography)。
 
7、色譜圖
組分(fēn)在檢測器上産(chǎn)生的信号強度對時間(t)所作(zuò)的圖，由于它記錄了各組分(fēn)流出色譜柱的情況，所以又(yòu)叫色譜流出曲線(xiàn)。流出曲線(xiàn)的突起部分(fēn)稱為(wèi)色譜峰。
 
8、色譜保留值
色譜保留值是色譜定性分(fēn)析的依據，它體(tǐ)現了各待測組分(fēn)在色譜柱上的滞留情況。在固定相中(zhōng)溶解性能(néng)越好，或與固定相的吸附性能(néng)越強的組分(fēn)，在柱中(zhōng)的滞留時間越長(cháng)，或者說将組分(fēn)帶出色譜柱所需的流動相體(tǐ)積越大。所以保留值可(kě)以用(yòng)保留時間和保留體(tǐ)積兩套參數來描述。
 
9、色譜圖上的色譜流出曲線(xiàn)可(kě)以說明什麽問題
根據色譜峰的數目，可(kě)判斷樣品中(zhōng)所含組分(fēn)的最少個數；根據色譜峰的保留值進行定性分(fēn)析；根據色譜峰的面積或峰高進行定量分(fēn)析；根據色譜峰的保留值和區(qū)域寬度評價色譜柱的分(fēn)離效能(néng)；根據兩峰間的距離，可(kě)評價固定相及流動相選擇是否合适。
 
10、分(fēn)配比
分(fēn)配比是指，在一定溫度下，組分(fēn)在兩相間分(fēn)配達到平衡時的質(zhì)量比。
 
11、在色譜流出曲線(xiàn)上，兩峰之間的距離主要由兩組分(fēn)在兩相間的分(fēn)配系數還是擴散速度決定？為(wèi)什麽？
分(fēn)配系數。兩峰間的距離由熱力學(xué)因素決定，兩組分(fēn)在兩相中(zhōng)分(fēn)配系數差異越大，兩峰間的距離則相差越大，越容易被分(fēn)離。而擴散速度是動力學(xué)因素，反映在色譜流出曲線(xiàn)上即為(wèi)色譜峰的區(qū)域寬度（形狀）。
 
12、色譜理(lǐ)論需要解決的問題
色譜分(fēn)離過程的熱力學(xué)和動力學(xué)問題。影響分(fēn)離及柱效的因素與提高柱效的途徑，柱效與分(fēn)離度的評價指标及其關系。
 
13、組分(fēn)保留時間為(wèi)何不同？色譜峰為(wèi)何變寬？
組分(fēn)保留時間：色譜過程的熱力學(xué)因素控制；（組分(fēn)和固定液的結構和性質(zhì)）。色譜峰變寬：色譜過程的動力學(xué)因素控制；（兩相中(zhōng)的運動阻力，擴散作(zuò)用(yòng)）。塔闆理(lǐ)論和速率理(lǐ)論分(fēn)别從熱力學(xué)和動力學(xué)的角度闡述了色譜分(fēn)離效能(néng)及其影響因素。
 
14、半經驗理(lǐ)論
将色譜分(fēn)離過程比拟作(zuò)蒸餾過程，将連續的色譜分(fēn)離過程分(fēn)割成多(duō)次的平衡過程的重複（類似于蒸餾塔塔闆上的平衡過程）。
 
15、塔闆理(lǐ)論的特點
塔闆理(lǐ)論引入了塔闆數和塔闆高度作(zuò)為(wèi)柱效的衡量指标；不同物(wù)質(zhì)在同一色譜柱上的分(fēn)配系數不同，用(yòng)有(yǒu)效塔闆數和有(yǒu)效塔闆高度作(zuò)為(wèi)衡量柱效能(néng)的指标時，應指明測定物(wù)質(zhì)；柱效不能(néng)表示被分(fēn)離組分(fēn)的實際分(fēn)離效果，當兩組分(fēn)的分(fēn)配系數K相同時，無論該色譜柱的塔闆數多(duō)大，都無法分(fēn)離。
 
16、塔闆理(lǐ)論的不足
塔闆理(lǐ)論的基本假設不符合色譜柱的實際分(fēn)離過程。塔闆理(lǐ)論無法解釋同一色譜柱在不同的流動相流速下柱效不同的實驗結果，不能(néng)說明色譜峰為(wèi)什麽會展寬，同時未能(néng)指出影響柱效的因素及提高柱效的途徑和方法。
 
17、速率方程（也稱範第姆特方程式）
H = A + B/u + C·u ， 
H：塔闆高度；
u：流動相的平均線(xiàn)速度(cm/s)。
A─渦流擴散項：A與流動相性質(zhì)、流動相速率無關。要減小(xiǎo)A值，需要從提高固定相的顆粒細度和均勻性以及填充均勻性來解決。對于空心毛細管柱，A=0。固定相顆粒越小(xiǎo)dp↓，填充的越均勻，A↓，H↓，柱效n↑。表現在渦流擴散所引起的色譜峰變寬現象減輕，色譜峰較窄。
B/u —分(fēn)子擴散項：存在着濃度差，産(chǎn)生縱向擴散；擴散導緻色譜峰變寬，H↑(n↓)，分(fēn)離變差;；分(fēn)子擴散項與流速有(yǒu)關，流速↓，滞留時間↑，擴散↑；擴散系數：Dg ∝(M載氣)-1/2 ；M載氣↑，B值↓。
C ·u —傳質(zhì)阻力項：dp↓， df↓, D ↑ ,可(kě)降低傳質(zhì)阻力。
 
18、H - u曲線(xiàn)與最佳流速
由于流速對這兩項完全相反的作(zuò)用(yòng)，流速對柱效的總影響使得存在着一個最佳流速值，即速率方程式中(zhōng)塔闆高度對流速的一階導數有(yǒu)一極小(xiǎo)值。以塔闆高度H對應流速u作(zuò)圖，曲線(xiàn)最低點的流速即為(wèi)最佳流速。
 
19、速率理(lǐ)論的要點
組分(fēn)分(fēn)子在柱内運行的多(duō)路徑與渦流擴散、濃度梯度所造成的分(fēn)子擴散及傳質(zhì)阻力使兩相間的分(fēn)配平衡不能(néng)瞬間達到等因素是造成色譜峰擴展、柱效下降的主要原因；通過選擇适當的固定相粒度、載氣種類、液膜厚度及載氣流速可(kě)提高柱效；速率理(lǐ)論為(wèi)色譜分(fēn)離和操作(zuò)條件選擇提供了理(lǐ)論指導。
闡明了流速和柱溫對柱效及分(fēn)離的影響；各種因素相互制約，如載氣流速增大，分(fēn)子擴散項的影響減小(xiǎo)，使柱效提高，但同時傳質(zhì)阻力項的影響增大，又(yòu)使柱效下降；柱溫升高，有(yǒu)利于傳質(zhì)，但又(yòu)加劇了分(fēn)子擴散的影響。選擇最佳條件，才能(néng)使柱效達到最高。
 
20、色譜定性方法
（1）與标樣對照的方法：利用(yòng)保留值定性：通過對比試樣中(zhōng)具(jù)有(yǒu)與純物(wù)質(zhì)相同保留值的色譜峰，來确定試樣中(zhōng)是否含有(yǒu)該物(wù)質(zhì)及在色譜圖中(zhōng)的位置。不适用(yòng)于不同儀器上獲得的數據之間的對比。
利用(yòng)加入法定性：将純物(wù)質(zhì)加入到試樣中(zhōng)，觀察各組分(fēn)色譜峰的相對變化。
（2）利用(yòng)文(wén)獻保留值定性：利用(yòng)相對保留值r21定性。相對保留值r21僅與柱溫和固定相性質(zhì)有(yǒu)關。在色譜手冊中(zhōng)都列有(yǒu)各種物(wù)質(zhì)在不同固定相上的保留數據，可(kě)以用(yòng)來進行定性鑒定。
21、色譜定量分(fēn)析
（1）定量校正因子：試樣中(zhōng)各組分(fēn)質(zhì)量與其色譜峰面積成正比，即：m i = fi’ ·Ai ；絕對校正因子：比例系數f i ，單位面積對應的物(wù)質(zhì)量：f i ’ =m i / Ai ；相對校正因子f i ：即組分(fēn)的絕對校正因子與标準物(wù)質(zhì)的絕對校正因子之比。
 
（2）常用(yòng)的幾種定量方法：

①歸一化法：特點及要求：歸一化法簡便、準确；進樣量的準确性和操作(zuò)條件的變動對測定結果影響不大；僅适用(yòng)于試樣中(zhōng)所有(yǒu)組分(fēn)全出峰的情況。

②外标法——标準曲線(xiàn)法：特點及要求：外标法不使用(yòng)校正因子，準确性較高，操作(zuò)條件變化對結果準确性影響較大。對進樣量的準确性控制要求較高，适用(yòng)于大批量試樣的快速分(fēn)析。

③内标法：内标物(wù)要滿足以下要求：（a）試樣中(zhōng)不含有(yǒu)該物(wù)質(zhì)；（b）與被測組分(fēn)性質(zhì)比較接近；（c）不與試樣發生化學(xué)反應；（d）出峰位置應位于被測組分(fēn)附近，且能(néng)分(fēn)離開；（e）加入量适中(zhōng)并與待測組分(fēn)接近。

内标法特點：内标法的準确性較高，操作(zuò)條件和進樣量的稍許變動對定量結果的影響不大；每個試樣的分(fēn)析，都要進行兩次稱量，不适合大批量試樣的快速分(fēn)析；若将内标法中(zhōng)的試樣取樣量和内标物(wù)加入量固定，則：wi=Ai/As *常數。

 

 
二

 

氣相色譜法

 

1、氣相色譜法（GC）
是以氣體(tǐ)為(wèi)流動相的色譜分(fēn)析法。
 
2、氣相色譜缺點
要求樣品氣化，不适用(yòng)于大部分(fēn)沸點高和熱不穩定的化合物(wù)，對于腐蝕性能(néng)和反應性能(néng)較強的物(wù)質(zhì)更難于分(fēn)析。
大約有(yǒu)15%-20%的有(yǒu)機物(wù)能(néng)用(yòng)氣相色譜法進行分(fēn)析。
 
3、氣相色譜儀的組成
氣路系統、進樣系統、分(fēn)離系統、檢測系統、溫控系統、記錄系統。
 
4、氣路系統
包括氣源、淨化器和載氣流速控制；常用(yòng)的載氣有(yǒu)：氫氣、氮氣、氦氣:。
 
5、進樣系統
包括進樣裝(zhuāng)置和氣化室。
氣體(tǐ)進樣器（六通閥）：試樣首先充滿定量管，切入後，載氣攜帶定量管中(zhōng)的試樣氣體(tǐ)進入分(fēn)離柱；液體(tǐ)進樣器：不同規格的微量注射器，填充柱色譜常用(yòng)10μL；毛細管色譜常用(yòng)1μL；新(xīn)型儀器帶有(yǒu)全自動液體(tǐ)進樣器，清洗、潤沖、取樣、進樣、換樣等過程自動完成，一次可(kě)放置數十個試樣。
 
6、進樣方式
分(fēn)流進樣：樣品在汽化室内氣化，蒸氣大部分(fēn)經分(fēn)流管道放空，隻有(yǒu)極小(xiǎo)一部分(fēn)被載氣導入色譜柱；
不分(fēn)流進樣：樣品直接注入色譜的汽化室，經過揮發後全部引入色譜柱。
 
7、分(fēn)離系統
色譜柱：填充柱（2-6 mm直徑，1-5 m長(cháng)），毛細管柱（0.1-0.5 mm直徑, 幾十米長(cháng)）。
 
8、溫控系統的作(zuò)用(yòng)
溫度是色譜分(fēn)離條件的重要選擇參數，氣化室、色譜柱恒溫箱、檢測器三部分(fēn)在色譜儀操作(zuò)時均需控制溫度。
氣化室：保證液體(tǐ)試樣瞬間氣化；
檢測器：保證被分(fēn)離後的組分(fēn)通過時不在此冷凝；
色譜柱恒溫箱：準确控制分(fēn)離需要的溫度。
 
9、檢測系統
作(zuò)用(yòng)：将色譜分(fēn)離後的各組分(fēn)的量轉變成可(kě)測量的電(diàn)信号。
指标：靈敏度、線(xiàn)性範圍、響應速度、結構、通用(yòng)性。
通用(yòng)型——對所有(yǒu)物(wù)質(zhì)均有(yǒu)響應；
專屬型——對特定物(wù)質(zhì)有(yǒu)高靈敏響應。
檢測器類型：濃度型檢測器、熱導檢測器、電(diàn)子捕獲檢測器、質(zhì)量型檢測器、氫火焰離子化檢測器、火焰光度檢測器。
 
10、熱導檢測器的主要特點
結構簡單，穩定性好；對無機物(wù)和有(yǒu)機物(wù)都有(yǒu)響應，不破壞樣品；靈敏度不高。
 
11、氫火焰離子化檢測器的特點
優點：(1)典型的質(zhì)量型檢測器；
(2)通用(yòng)型檢測器（測含C有(yǒu)機物(wù)）；
(3)氫焰檢測器具(jù)有(yǒu)結構簡單、穩定性好、靈敏度高、響應迅速、死體(tǐ)積小(xiǎo)、線(xiàn)性範圍寬等特點；
(4)比熱導檢測器的靈敏度高出近3個數量級，檢測下限可(kě)達10-12g·g-1。
缺點：(1)對載氣要求高；
(2)檢測時要破壞樣品，無法回收樣品；
(3)不能(néng)檢測永久性氣體(tǐ)、水及四氯化碳等。
 
12、電(diàn)子俘獲檢測器的特點
對鹵素、硫、磷、氮、氧有(yǒu)很(hěn)強的響應；靈敏度高，可(kě)用(yòng)于痕量農藥殘留物(wù)的分(fēn)析；線(xiàn)性範圍較窄。
 
13、火焰光度檢測器（FPD）
是一種對含硫、磷化合物(wù)具(jù)有(yǒu)高選擇性的檢測器。含硫、磷化合物(wù)在富氫火焰中(zhōng)燃燒被打成有(yǒu)機碎片，發出不同波長(cháng)的特征光譜。
 
14、固定相
固體(tǐ)固定相：固體(tǐ)吸附劑；
液體(tǐ)固定相：由載體(tǐ)和固定液組成；聚合物(wù)固定相。
 
15、固體(tǐ)固定相
一般為(wèi)固體(tǐ)吸附劑，常用(yòng)的有(yǒu)活性炭，矽膠，氧化鋁和分(fēn)子篩。
優點：吸附容量大、熱穩定性好、價格便宜；
缺點：柱效低、吸附活性中(zhōng)心易中(zhōng)毒，使用(yòng)前要進行活化。
應用(yòng)：主要用(yòng)于惰性氣體(tǐ)、H2、O2、N2、CO、CO2和CH4等一般氣體(tǐ)和低沸點物(wù)質(zhì)。
 
16、作(zuò)為(wèi)載體(tǐ)使用(yòng)的物(wù)質(zhì)應滿足的條件
表面有(yǒu)微孔結構，孔徑均勻，比表面積大；化學(xué)和物(wù)理(lǐ)惰性，即與樣品組分(fēn)不起化學(xué)反應，無吸附作(zuò)用(yòng)或吸附很(hěn)弱；熱穩定性好；有(yǒu)一定的機械強度和浸潤性，不易破碎；具(jù)有(yǒu)一定的粒度和規則的形狀，最好是球形。
 
17、對固定液的要求
在使用(yòng)溫度下是液體(tǐ)，具(jù)有(yǒu)較低的揮發性；具(jù)有(yǒu)良好的熱穩定性；對要分(fēn)離的各組分(fēn)應具(jù)有(yǒu)合适的分(fēn)配系數；化學(xué)穩定性好，不與樣品組分(fēn)、載氣、載體(tǐ)發生任何化學(xué)反應。
 
18、固定液的分(fēn)類
非極性固定液、中(zhōng)等極性固定液、強極性固定液、氫鍵型固定液。
 
19、非極性固定液
主要是一些飽和烷烴和甲基矽油，它們與待測物(wù)質(zhì)分(fēn)子之間的作(zuò)用(yòng)力以色散力為(wèi)主。組分(fēn)按沸點由低到高順序流出，若樣品中(zhōng)兼有(yǒu)極性和非極性組分(fēn)，則同沸點的極性組分(fēn)先出峰。常用(yòng)的固定液有(yǒu)角鲨烷（異三十烷）、阿皮松等。适用(yòng)于非極性和弱極性化合物(wù)的分(fēn)析。
 
20、中(zhōng)等極性固定液
由較大的烷基和少量的極性基團或可(kě)以誘導極化的基團組成，它們與待測物(wù)質(zhì)分(fēn)子間的作(zuò)用(yòng)力以色散力和誘導力為(wèi)主，組分(fēn)基本上按沸點順序出峰，同沸點的非極性組分(fēn)先出峰。常用(yòng)的固定液有(yǒu)鄰苯二甲酸二壬酯、聚酯等，适用(yòng)于弱極性和中(zhōng)等極性化合物(wù)的分(fēn)析。
 
21、強極性固定液
含有(yǒu)較強的極性基團，它們與待測物(wù)質(zhì)分(fēn)子間作(zuò)用(yòng)力以靜電(diàn)力和誘導力為(wèi)主，組分(fēn)按極性由小(xiǎo)到大的順序出峰。常用(yòng)的固定液有(yǒu)氧二丙腈等，适用(yòng)于極性化合物(wù)的分(fēn)析。
 
22、氫鍵型固定液
是強極性固定液中(zhōng)特殊的一類，與待測物(wù)質(zhì)分(fēn)子間作(zuò)用(yòng)力以氫鍵力為(wèi)主，組分(fēn)依形成氫鍵的難易程度出峰，不易形成氫鍵的組分(fēn)先出峰。常用(yòng)的固定液有(yǒu)聚乙二醇、三乙醇胺等，适用(yòng)于分(fēn)析含F、N、O等的化合物(wù)。
 
23、固定液的選擇
①按極性相似原則選擇：極性相似，溶解度大，分(fēn)配系數大，保留時間長(cháng)；
②按官能(néng)團相似選擇：酯類---酯或聚酯類固定液；醇類---聚乙二醇固定液；
③按主要差别選擇：各組分(fēn)間沸點是主要差别----非極性固定液；極性為(wèi)主要差别----極性固定液；
④選擇混合固定液：對于難分(fēn)離的複雜樣品，可(kě)選用(yòng)兩種或兩種以上固定液。
 
24、聚合物(wù)固定相
既可(kě)作(zuò)為(wèi)固體(tǐ)固定相，也可(kě)作(zuò)為(wèi)載體(tǐ)，又(yòu)稱高分(fēn)子多(duō)孔微球。物(wù)質(zhì)在其表面既存在吸附作(zuò)用(yòng)，又(yòu)存在溶解作(zuò)用(yòng)。
（1）具(jù)有(yǒu)較大的比表面積，表面孔徑均勻；
（2）對非極性及極性物(wù)質(zhì)無有(yǒu)害的吸附活性，拖尾現象小(xiǎo)，極性組分(fēn)也能(néng)出對稱峰；（3）由于不存在液膜，無流失現象，熱穩定性好；
（4）機械強度和耐腐蝕性較好，系均勻球形，在填充柱色譜中(zhōng)均勻性、重現性好，有(yǒu)助于減少渦流擴散。
25、載氣種類的選擇
檢測器的适應性；載氣流速的大小(xiǎo)。
 
26、柱溫的選擇
（1）首先應使柱溫控制在固定液的最高使用(yòng)溫度（超過該溫度固定液易流失）和最低使用(yòng)溫度（低于此溫度固定液以固體(tǐ)形式存在）範圍之内。
（2）提高柱溫，可(kě)以改善傳質(zhì)阻力，有(yǒu)利于提高柱效，縮短分(fēn)析時間，但降低了容量因子和選擇性，不利于分(fēn)離。
一般的原則是：在使最難分(fēn)離的組分(fēn)盡可(kě)能(néng)分(fēn)離的前提下，盡量采用(yòng)較低的柱溫，但以保留時間适宜，峰形不拖尾為(wèi)度。
（3）柱溫一般選擇在接近或略低于組分(fēn)平均沸點時的溫。
 
27、載體(tǐ)和固定液含量的選擇
配比：固定液在載體(tǐ)上的塗漬量，一般指的是固定液與擔體(tǐ)的百分(fēn)比，填充柱的配比通常在5%～25%之間。配比越低，擔體(tǐ)上形成的液膜越薄，傳質(zhì)阻力越小(xiǎo)，柱效越高，分(fēn)析速度也越快。配比較低時，固定相的負載量低，允許的進樣量較小(xiǎo)。分(fēn)析工(gōng)作(zuò)中(zhōng)通常傾向于使用(yòng)較低的配比。
 
28、進樣條件的選擇
進樣量應控制在柱容量允許範圍及檢測器線(xiàn)性檢測範圍之内。進樣要求動作(zuò)快、時間短；氣化室一般較柱溫高30~70°C。
 
29、提高色譜分(fēn)離能(néng)力的途徑
(1)塔闆理(lǐ)論：增加柱長(cháng)，減小(xiǎo)柱徑，即增加柱子塔闆數；
(2)速率理(lǐ)論：減小(xiǎo)組分(fēn)在柱中(zhōng)的渦流擴散和傳質(zhì)阻力，可(kě)降低塔闆高度。
 
30、毛細管色譜柱的結構特點
（1）不裝(zhuāng)填料阻力小(xiǎo)，長(cháng)度可(kě)達百米的毛細管柱，管徑0.2mm。
（2）氣流單途徑通過柱子，消除了組分(fēn)在柱中(zhōng)的渦流擴散。
（3）固定液直接塗在管壁上，總柱内壁面積較大,塗層很(hěn)薄，則氣相和液相傳質(zhì)阻力大大降低。
（4）毛細管色譜柱柱效高達每米3000～4000塊理(lǐ)論塔闆，一支長(cháng)度100米的毛細管柱，總的理(lǐ)論塔闆數可(kě)達104～106。
 
31、毛細管色譜具(jù)有(yǒu)以下優點
（1）分(fēn)離效率高：比填充柱高10～100倍；
（2）分(fēn)析速度快：用(yòng)毛細管色譜分(fēn)析比用(yòng)填充柱色譜速度；
（3）色譜峰窄、峰形對稱。較多(duō)采用(yòng)程序升溫方式；
（4）靈敏度高，一般采用(yòng)氫焰檢測器。
（5）渦流擴散為(wèi)零。
 
32、毛細管色譜的類型
（1）塗壁毛細管柱：将固定液直接塗敷在管内壁上。柱制作(zuò)相對簡單，但柱制備的重現性差、壽命短。
（2）多(duō)孔層毛細管柱：在管壁上塗敷一層多(duō)孔性吸附劑固體(tǐ)微粒。構成毛細管氣固色譜。
（3）載體(tǐ)塗漬毛細管柱：将非常細的擔體(tǐ)微粒粘接在管壁上，再塗固定液。柱效較塗壁毛細管柱高。
（4）化學(xué)鍵合或交聯毛細管柱：将固定液通過化學(xué)反應鍵合在管壁上或交聯在一起。使柱效和柱壽命進一步提高。

 

 
三

 

高效液相色譜法

 

1、與氣相色譜相比液相色譜的優點
與氣相色譜法相比，液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分(fēn)子質(zhì)量的限制，隻要求把樣品制成溶液即可(kě)，非常适合于分(fēn)離生物(wù)大分(fēn)子、離子型化合物(wù)，不穩定的天然産(chǎn)物(wù)以及其他(tā)各種高分(fēn)子化合物(wù)等。此外，液相色譜的流動相不僅起到使樣品沿色譜柱移動的作(zuò)用(yòng)，而且與固定相一樣，與樣品分(fēn)子發生選擇性的相互作(zuò)用(yòng)，這就為(wèi)控制和改善分(fēn)離條件提供了一個額外的可(kě)變因素。而氣相色譜法采用(yòng)的流動相是惰性氣體(tǐ)，對組分(fēn)沒有(yǒu)親和力，僅起運載作(zuò)用(yòng)。
 
2、液相色譜特點
高壓、高速、高效、高靈敏度、高沸點、熱不穩定有(yǒu)機及生化試樣的高效分(fēn)離分(fēn)析方法。
 
3、高效液相相色譜儀的組成
高壓輸液系統、進樣系統、分(fēn)離系統、檢測系統、數據處理(lǐ)系統。
 
4、脫氣
流動相使用(yòng)前必須脫氣。常用(yòng)的脫氣方法有(yǒu)：低壓脫氣法（電(diàn)磁攪拌、水泵抽空，可(kě)同時加熱或向溶劑吹氮氣）、吹氦氣脫氣法和超聲波脫氣法等。
 
5、梯度洗脫
用(yòng)兩種（或多(duō)種）不同極性的溶劑，在分(fēn)離過程中(zhōng)按一定程序連續改變流動相中(zhōng)溶劑的配比和極性，通過流動相中(zhōng)極性的變化來改變被分(fēn)離組分(fēn)的分(fēn)離因素，以提高分(fēn)離效果。
（1）高壓梯度（内梯度）
特點是先加壓後混合。将溶劑用(yòng)高壓泵增壓以後輸入色譜系統的梯度混合室，加以混合後送入色譜柱。
（2）低壓梯度（外梯度）
特點是先混合後加壓。在常壓下預先按一定的程序将溶劑混合後再用(yòng)泵輸入色譜柱。
 
6、進樣系統要求
良好的密封性，最小(xiǎo)的死體(tǐ)積，最好的穩定性，進樣時對色譜系統壓力、流量影響較小(xiǎo)。
7、分(fēn)離系統
色譜柱是實現分(fēn)離的核心部件。由柱管和固定相組成。柱管為(wèi)直型不鏽鋼管。一般色譜柱長(cháng)5~30 cm，内徑4~5 mm，凝膠色譜柱内徑3~12 mm，而制備色譜柱内徑則可(kě)達25 mm。一般淋洗溶劑在進入色譜分(fēn)離柱之前，先通過前置柱。HPLC柱的填料顆粒粒徑一般約為(wèi)3~10 mm，填充常采用(yòng)勻漿法。色譜柱的發展趨勢是減小(xiǎo)填料粒度和柱徑以提高柱效。
 
8、檢測系統
作(zuò)用(yòng)——用(yòng)來連續監測經色譜柱分(fēn)離後的流出物(wù)的組成和含量變化的裝(zhuāng)置。紫外-可(kě)見吸收檢測器、光電(diàn)二極管陣列檢測器、示差折光檢測器、熒光檢測器、電(diàn)化學(xué)檢測器。
 
9、高效液相色譜法對流動相的要求
流動相不與色譜柱發生不可(kě)逆化學(xué)變化，以保持柱效或柱子的保留性質(zhì)較長(cháng)時間不變；對待測樣品有(yǒu)足夠的溶解能(néng)力；與所用(yòng)檢測器相匹配；粘度盡可(kě)能(néng)小(xiǎo)，以獲得較高的柱效；流動相純度要高，價格便宜，毒性小(xiǎo)。
 
10、高效液相色譜法的固定相的分(fēn)類
（1）按固定相承受壓力分(fēn)：剛性固體(tǐ)：以二氧化矽為(wèi)基質(zhì)，可(kě)承受較高壓力，表面可(kě)鍵合各種功能(néng)官能(néng)團---鍵合固定相，是目前應用(yòng)最廣泛的固定相。
硬膠：主要用(yòng)于離子交換色譜法和凝膠色譜法中(zhōng)，由聚苯乙烯與二乙烯基苯交聯而成，可(kě)承受的壓力較低。
（2）按孔隙深度分(fēn)：表面多(duō)孔型：基體(tǐ)是球形玻璃珠，在玻璃表面塗覆一層多(duō)孔活性物(wù)質(zhì)如矽膠、氧化鋁、聚酰胺、離子交換樹脂、分(fēn)子篩等。
優點：适用(yòng)于快速分(fēn)離、填充均勻緊密、機械強度高、能(néng)承受高壓，适于簡單的樣品及常規分(fēn)析。
缺點：多(duō)孔層薄，進樣量受限制。
全多(duō)孔型：由矽膠顆粒聚集而成，比表面積大，柱容量大，小(xiǎo)顆粒全孔型固定相孔洞淺傳質(zhì)速率快，柱效高，分(fēn)離效果好，适合于複雜樣品、痕量組分(fēn)的分(fēn)離分(fēn)析，是目前HPLC中(zhōng)應用(yòng)最廣泛的固定相。
 
11、液固吸附色譜法原理(lǐ)
是以固體(tǐ)吸附劑為(wèi)固定相，吸附劑表面的活性中(zhōng)心具(jù)有(yǒu)吸附能(néng)力，試樣分(fēn)子被流動相帶入柱内時，它将與流動相溶劑分(fēn)子在吸附劑表面發生競争吸附。分(fēn)離過程是一個吸附-解吸的平衡過程。
 
12、液固吸附色譜法固定相
通常是矽膠、氧化鋁、活性炭等固體(tǐ)吸附劑。矽膠最常用(yòng)。
流動相：極性大的試樣需用(yòng)極性強的洗脫劑，極性弱的試樣宜用(yòng)極性弱的洗脫劑。
應用(yòng)：幾何異構體(tǐ)分(fēn)離和族分(fēn)離，如農藥異構體(tǐ)；石油中(zhōng)烷、烯、芳烴的分(fēn)離。
不适于強極性的離子型樣品的分(fēn)離，不适于分(fēn)離同系物(wù)（因為(wèi)它對相對分(fēn)子質(zhì)量的選擇性較小(xiǎo)）。
 
13、液液分(fēn)配色譜法原理(lǐ)
根據物(wù)質(zhì)在兩種互不相溶（或部分(fēn)互溶）的液體(tǐ)中(zhōng)溶解度的不同實現分(fēn)離。分(fēn)配系數較大的組分(fēn)保留值也較大。
 
14、液液分(fēn)配色譜法流動相
流動相與固定液應盡量不互溶，或者二者的極性相差越大越好。根據流動相與固定相極性的差别程度，可(kě)将液液色譜分(fēn)為(wèi)正相分(fēn)配色譜（流動相極性小(xiǎo)于固定相極性，極性小(xiǎo)的先流出，适于強極性和中(zhōng)等極性組分(fēn)分(fēn)離）和反相分(fēn)配色譜（流動相極性大于固定相極性，極性大的先流出，适于非極性或弱極性組分(fēn)分(fēn)離）。
固定相：由載體(tǐ)和固定液組成。常用(yòng)的固定液有(yǒu)b,b’-氧二丙腈、聚乙二醇、聚酰胺、正十八烷、角鲨烷等。
應用(yòng)：同系物(wù)組分(fēn)的分(fēn)離。例：分(fēn)離水解蛋白質(zhì)所生成的各種氨基酸，分(fēn)離脂肪酸同系物(wù)等。
 
15、化學(xué)鍵合固定相
化學(xué)鍵合固定相是利用(yòng)化學(xué)反應将有(yǒu)機分(fēn)子鍵合到載體(tǐ)表面上，形成均一、牢固的單分(fēn)子薄層而構成各種性能(néng)的固定相。
 
16、化學(xué)鍵合固定相的特點
固定相不易流失，柱的穩定性和壽命較高；能(néng)耐受各種溶劑，可(kě)用(yòng)于梯度洗脫；表面較為(wèi)均一。沒有(yǒu)液坑，傳質(zhì)快，柱效高；能(néng)鍵合不同基團以改變其選擇性。例如，鍵合氰基、氨基等極性集團用(yòng)于正相色譜法，鍵合離子交換基團用(yòng)于離子色譜法，鍵合C2，C4，C6，C8，C18，C16，C18，C22烷基和苯基等非極性基團用(yòng)于反相色譜法等。因此，它是HPLC較為(wèi)理(lǐ)想的固定相。
 
17、離子交換色譜法原理(lǐ)
離子交換色譜法的固定相是離子交換樹脂，流動相是水溶液，它是利用(yòng)待測樣品中(zhōng)各組分(fēn)離子與離子交換樹脂的親和力的不同而進行分(fēn)離的。
 
18、離子交換色譜法流動相
水的緩沖溶液。陰離子離子交換樹脂作(zuò)固定相，采用(yòng)酸性水溶液；陽離子離子交換樹脂作(zuò)固定相，采用(yòng)堿性水溶液；
應用(yòng)：離子及可(kě)離解的化合物(wù)，氨基酸、核酸等。
 
19、凝膠色譜法原理(lǐ)
凝膠色譜法的固定相為(wèi)多(duō)孔性凝膠類物(wù)質(zhì)，流動相為(wèi)水溶液或有(yǒu)機溶劑，它是根據不同組分(fēn)分(fēn)子體(tǐ)積的大小(xiǎo)進行分(fēn)離的。小(xiǎo)分(fēn)子可(kě)以擴散到凝膠空隙，由其中(zhōng)通過，出峰最慢；中(zhōng)等分(fēn)子隻能(néng)通過部分(fēn)凝膠空隙，中(zhōng)速通過；而大分(fēn)子被排斥在外，出峰最快；溶劑分(fēn)子小(xiǎo)，故在最後出峰。全部在死體(tǐ)積前出峰；可(kě)對相對分(fēn)子質(zhì)量在100-105範圍内的化合物(wù)按質(zhì)量分(fēn)離。
 
20、凝膠色譜法流動相
能(néng)溶解樣品且與凝膠相似(潤濕凝膠并防止吸附作(zuò)用(yòng))、粘度小(xiǎo)(增加擴散速度)。常用(yòng)四氫呋喃、苯、氯仿、水等。
 
21、影響分(fēn)離的因素與提高柱效的途徑
（1）液體(tǐ)的黏度比氣體(tǐ)大一百倍，密度為(wèi)氣體(tǐ)的一千倍左右，故降低傳質(zhì)阻力是提高柱效主要途徑。
（2）由速率方程，降低固定相粒度可(kě)提高柱效。
（3）液相色譜中(zhōng)，不可(kě)能(néng)通過增加柱溫來改善傳質(zhì)。
（4）恒溫改變淋洗液組成、極性是改善分(fēn)離的最直接的因素。
（5）流速大于0.5 cm/s時, H～u曲線(xiàn)是一段斜率不大的直線(xiàn)。降低流速，柱效提高不是很(hěn)大。但在實際操作(zuò)中(zhōng)，流量仍是一個調整分(fēn)離度和出峰時間的重要可(kě)選擇參數。
（6）氣相色譜中(zhōng)的固定液原則上都可(kě)以用(yòng)于液相色譜，其選用(yòng)原則與氣相色譜一樣。但在高效液相色譜中(zhōng)，分(fēn)離柱的制備是一項技(jì )術要求非常高的工(gōng)作(zuò)，一般很(hěn)少自行制備。
  
 
四

 

質(zhì)譜分(fēn)析法

 

 
1、質(zhì)譜法定義
是将待測物(wù)質(zhì)置于離子源中(zhōng)電(diàn)離形成帶電(diàn)離子，讓離子加速并通過磁場或電(diàn)場後，離子将按質(zhì)荷比（m/z）大小(xiǎo)分(fēn)離，形成質(zhì)譜圖。依據質(zhì)譜線(xiàn)的位置和質(zhì)譜線(xiàn)的相對強度建立的分(fēn)析方法稱為(wèi)質(zhì)譜法。
 
2、質(zhì)譜的作(zuò)用(yòng)
準确測定物(wù)質(zhì)的分(fēn)子量；質(zhì)譜法是唯一可(kě)以确定分(fēn)子式的方法；根據碎片特征進行化合物(wù)的結構分(fēn)析。
 
3、質(zhì)譜分(fēn)析的基本原
質(zhì)譜法是利用(yòng)電(diàn)磁學(xué)原理(lǐ)，将待測樣品分(fēn)子解離成具(jù)有(yǒu)不同質(zhì)量的離子，然後按其質(zhì)荷比（m/z）的大小(xiǎo)依次排列收集成質(zhì)譜。根據質(zhì)譜中(zhōng)的分(fēn)子離子峰（M·+）可(kě)以獲得樣品分(fēn)子的相對分(fēn)子質(zhì)量信息；根據各離子峰（分(fēn)子離子峰、同位素離子峰、碎片離子峰、亞穩離子峰、重排離子峰等）及其相對強度和氮數規則，可(kě)以确定化合物(wù)的分(fēn)子式；根據各離子峰及物(wù)質(zhì)化學(xué)鍵的斷裂規律可(kě)以進行定性分(fēn)析和結構分(fēn)析；根據組分(fēn)質(zhì)譜峰的峰高與濃度間的線(xiàn)性關系可(kě)以進行定量分(fēn)析。
 
4、質(zhì)譜分(fēn)析的過程
（1）進樣，化合物(wù)通過汽化引入電(diàn)離室；
（2）離子化，在電(diàn)離室，組分(fēn)分(fēn)子被一束加速電(diàn)子碰撞，撞擊使分(fēn)子電(diàn)離形成正離子；
（3）離子也可(kě)因撞擊強烈而形成碎片離子；
（4）荷正電(diàn)離子被加速電(diàn)壓V加速，産(chǎn)生一定的速度v，與質(zhì)量、電(diàn)荷及加速電(diàn)壓有(yǒu)關；
（5）加速正離子進入一個強度為(wèi)B的磁場（質(zhì)量分(fēn)析器），發生偏轉。
 
5、質(zhì)譜儀的組成
真空系統、進樣系統、離子源或電(diàn)離室、質(zhì)量分(fēn)析器、離子檢測器。
 
6、真空系統作(zuò)用(yòng)
是減少離子碰撞損失。
若真空度低：大量氧會燒壞離子源的燈絲；會使本底增高，幹擾質(zhì)譜圖；引起額外的離子-分(fēn)子反應，改變裂解模型，使質(zhì)譜解釋複雜化；幹擾離子源中(zhōng)電(diàn)子束的正常調節；用(yòng)作(zuò)加速離子的幾千伏高壓會引起放電(diàn)等。
 
7、進樣系統目的
高效重複地将樣品引入到離子源中(zhōng)并且不能(néng)造成真空度的降低。間歇式進樣系統——氣體(tǐ)及低沸點、易揮發的液體(tǐ)；直接探針進樣——高沸點的液體(tǐ)、固體(tǐ)；色譜進樣系統——有(yǒu)機化合物(wù)。
 
8、離子源或電(diàn)離室
作(zuò)用(yòng)是使試樣中(zhōng)的原子、分(fēn)子電(diàn)離成離子，其性能(néng)影響質(zhì)譜儀的靈敏度和分(fēn)辨率本領。電(diàn)子電(diàn)離源的特點：電(diàn)離電(diàn)壓：70eV；加一小(xiǎo)磁場增加電(diàn)離幾率；EI源電(diàn)離效率高,碎片離子多(duō)，結構信息豐富，有(yǒu)标準化合物(wù)質(zhì)譜庫；結構簡單，操作(zuò)方便；樣品在氣态下電(diàn)離，不能(néng)汽化的樣品不能(néng)分(fēn)析，主要用(yòng)于氣-質(zhì)聯用(yòng)儀；有(yǒu)些樣品得不到分(fēn)子離子。
9、化學(xué)電(diàn)離源特點
電(diàn)離能(néng)小(xiǎo)，質(zhì)譜峰數少，譜圖簡單；最強峰為(wèi)(M+1)+準分(fēn)子離子峰；不适用(yòng)難揮發試樣。
 
10、快原子轟擊源
高能(néng)量的Xe原子轟擊塗在靶上的樣品，濺射出離子流。本法适合于高極性、大分(fēn)子量、低蒸汽壓、熱穩定性差的樣品。FAB一般用(yòng)作(zuò)磁式質(zhì)譜的離子源。
 
11、電(diàn)噴霧源結構
噴嘴（金屬毛細管），霧化氣，幹燥氣。原理(lǐ)：噴霧蒸發電(diàn)壓。
特點：ESI是最軟的一種電(diàn)離方式，隻産(chǎn)生分(fēn)子離子，不産(chǎn)生碎片離子；适用(yòng)于強極性，大分(fēn)子量的樣品分(fēn)析，如肽，蛋白質(zhì)，糖等；産(chǎn)生的離子帶有(yǒu)多(duō)電(diàn)荷，尤其是生物(wù)大分(fēn)子；主要用(yòng)于液相色譜-質(zhì)譜聯用(yòng)儀，既用(yòng)作(zuò)液相色譜和質(zhì)譜儀之間的接口裝(zhuāng)置，同時又(yòu)是電(diàn)離裝(zhuāng)置。
 
12、場緻電(diàn)離源(FI)和場解吸電(diàn)離源(FD)
分(fēn)子離子峰強；碎片離子峰少；不适合化合物(wù)結構鑒定。
 
13、基質(zhì)輔助激光解吸電(diàn)離特點
準分(fēn)子離子峰很(hěn)強，且碎片離子少。通常用(yòng)于飛行時間質(zhì)譜，特别适合測定多(duō)肽、蛋白質(zhì)、DNA片段、多(duō)糖等的相對分(fēn)子質(zhì)量。
 
14、質(zhì)量分(fēn)析器作(zuò)用(yòng)
将離子源産(chǎn)生的離子按質(zhì)荷比m/z的大小(xiǎo)分(fēn)開。
 
15、單聚焦分(fēn)析器
離子的m/z與R,B, V有(yǒu)關。通過改變磁場可(kě)以把不同離子分(fēn)開。在一定磁感應強度B下，改變加速電(diàn)壓V可(kě)以使不同離子先後通過檢測器，實現質(zhì)量掃描，得到質(zhì)譜。
特點：結構簡單，操作(zuò)方便；隻有(yǒu)方向聚焦，無能(néng)量聚焦，分(fēn)辨率低。
 
16、雙聚焦分(fēn)析器
實現方向聚焦和能(néng)量（速度）聚焦；對于動能(néng)不同的離子，通過調節電(diàn)場能(néng)，達到聚焦的目的。
特點：分(fēn)辨率高。
 
17、四級杆質(zhì)量分(fēn)析器
特點：結構簡單，體(tǐ)積小(xiǎo)、重量輕，掃描速率快，适合與色譜聯機。
 
18、飛行時間質(zhì)量分(fēn)析器
特點：質(zhì)量範圍寬，掃描速率快，既不需磁場也不需電(diàn)場，隻需要直線(xiàn)漂移空間。
 
19、離子阱質(zhì)量分(fēn)析器
特定m/z離子在阱内一定軌道上穩定旋轉，改變端電(diàn)極電(diàn)壓，不同m/z離子飛出阱到達檢測器。
特點：結構簡單、易于操作(zuò)、靈敏度高。
 
20、質(zhì)譜的表示方法
質(zhì)譜一般可(kě)用(yòng)線(xiàn)譜或表譜兩種方法表示。常用(yòng)線(xiàn)譜，線(xiàn)譜上的各條直線(xiàn)表示一個離子峰，橫坐(zuò)标為(wèi)質(zhì)荷比m/z，縱坐(zuò)标為(wèi)離子的相對強度（相對豐度），一般将原始質(zhì)譜圖上最強的離子峰定為(wèi)基峰并定為(wèi)相對強度100％，其他(tā)離子峰以對基峰的相對百分(fēn)值表示。能(néng)夠很(hěn)直觀地觀察到整個分(fēn)子的質(zhì)譜全貌，質(zhì)譜表是用(yòng)表格形式表示的質(zhì)譜數據，質(zhì)譜表中(zhōng)有(yǒu)兩項即質(zhì)荷比及相對強度。對定量計算較直觀。
 
21、質(zhì)譜儀的分(fēn)辨率
分(fēn)辨率（R）指質(zhì)譜儀能(néng)區(qū)别鄰近兩個質(zhì)譜峰的能(néng)力。對兩個相等強度的相鄰峰，當兩峰間的峰谷不大于其峰高10％時，則認為(wèi)兩峰已經分(fēn)開。
 
22、質(zhì)譜圖中(zhōng)主要離子峰的類型
分(fēn)子離子峰、同位素離子峰、碎片離子峰、亞穩離子峰、重排離子峰。
 
23、相對分(fēn)子質(zhì)量的測定
分(fēn)子離子峰的m/z相當于該化合物(wù)的相對分(fēn)子質(zhì)量。一般除同位素離子峰外，分(fēn)子離子峰是質(zhì)譜圖中(zhōng)最大質(zhì)荷比的峰，位于質(zhì)譜圖的最右端。
 
24、确認分(fēn)子離子峰的方法
（1）分(fēn)子離子峰必須符合氮數規則。有(yǒu)機化合物(wù)含有(yǒu)偶數個氮原子或不含氮原子，分(fēn)子離子峰的m/z一定是偶數；含奇數個氮原子，分(fēn)子離子峰的m/z一定是奇數。
（2）分(fēn)子離子峰與相鄰離子峰的質(zhì)量差應合理(lǐ)，如不可(kě)能(néng)出現比分(fēn)子離子峰質(zhì)量小(xiǎo)4～13個質(zhì)量單位的峰。
（3）當化合物(wù)中(zhōng)含S,Br, Cl時，可(kě)利用(yòng)M+·, (M+2) +·等同位素離子峰的比例來确認分(fēn)子離子峰。
（4）改變質(zhì)譜儀的操作(zuò)條件，提高分(fēn)子離子峰的相對強度。采用(yòng)化學(xué)電(diàn)離源或降低電(diàn)子轟擊源電(diàn)壓可(kě)獲得較強的M+·峰。
 
25、氣相色譜-質(zhì)譜聯用(yòng)儀
質(zhì)譜：純物(wù)質(zhì)結構分(fēn)析。
色譜：化合物(wù)分(fēn)離，定性能(néng)力差。
色譜-質(zhì)譜聯用(yòng)：共同優點。GC-MS；LC-MS；CE-MS，色譜是質(zhì)譜的進樣及分(fēn)離系統；質(zhì)譜是色譜的檢測器。
主要問題：接口技(jì )術；除去色譜中(zhōng)大量的流動相分(fēn)子。
适用(yòng)範圍：适用(yòng)于揮發度低、難氣化、極性強、相對分(fēn)子質(zhì)量大及熱穩定性差的樣品。

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